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恒遠(yuǎn)問您:轉(zhuǎn)化大腸桿菌實(shí)驗(yàn)的目的是哪三個(gè)方面呢?

點(diǎn)擊次數(shù):13298   發(fā)布時(shí)間:2014/2/17 11:05:21

     隨著一場(chǎng)雨又迎來了一個(gè)新的工作日,可能剛起床那會(huì)還是睡眼惺忪,但是上班的時(shí)候可就要進(jìn)入工作狀態(tài)啦!相信當(dāng)聰明的您在看到本文章的標(biāo)題時(shí)就能夠知道,我們今天要為您談?wù)f的是關(guān)于轉(zhuǎn)化大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)。

    恒遠(yuǎn)問您:轉(zhuǎn)化大腸桿菌實(shí)驗(yàn)的目的是哪三個(gè)方面呢?當(dāng)然,這可不止簡(jiǎn)單的一個(gè)問題,既然我們問出了,那么就有答案啦。如果您現(xiàn)在移動(dòng)右手中的鼠標(biāo)去搜索轉(zhuǎn)化大腸桿菌實(shí)驗(yàn)的話一定會(huì)出現(xiàn)很多的相關(guān)資料,有朋友在購(gòu)買我公司的產(chǎn)品后提出了需要技術(shù)指導(dǎo),那么我們今天就來仔細(xì)的看看本實(shí)驗(yàn),*終來解答實(shí)驗(yàn)的目的是哪三個(gè)方面。
    我們?yōu)槟淼倪@套實(shí)驗(yàn)過程簡(jiǎn)單明了,只需要十個(gè)步驟就可以完成。
    1、事先將恒溫水浴的溫度調(diào)到42℃。
    2、從-70℃ 超低溫冰柜中取出一管(100 μl)感受態(tài)菌,立即用手指加溫融化后插入冰上,冰浴5~10 min。
    3、加入5 μl 連接好的質(zhì)粒混合液(DNA含量不超過100 ng),輕輕震蕩后放置冰上20 min。
    4、輕輕搖勻后插入42℃水浴中1~2 min進(jìn)行熱休克,然后迅速放回冰中,靜置3~5 min。
    5、在超凈工作臺(tái)中向上述各管中分別加入500 μl LB培養(yǎng)基(不含抗菌素)輕輕混勻,然后固定到搖床的彈簧架上37℃震蕩1 h。
    6、在超凈工作臺(tái)中取上述轉(zhuǎn)化混合液100-300 μl,分別滴到含合適抗菌素的固體LB平板培養(yǎng)皿中,用酒精燈燒過的玻璃涂布棒涂布均勻。
    7、如果載體和宿主菌適合藍(lán)白斑篩選的話,滴完菌液后再在平板上滴加40 μl 2% X-gal,8 μl 20% IPTG,用酒精燈燒過的玻璃涂布棒涂布均勻。
    8、在涂好的培養(yǎng)皿上做上標(biāo)記,先放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中30~60 min 直到表面的液體都滲透到培養(yǎng)基里后,再倒置過來放入37℃恒溫培養(yǎng)箱過夜。 
    9、在被細(xì)菌污染的桌面上噴灑70%乙醇,擦干桌面,寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
    10、觀察平板上長(zhǎng)出的菌落克隆,以菌落之間能互相分開為好。注意白色菌斑。
    上海恒遠(yuǎn)感謝您使用來時(shí)間觀看了本篇文章,如果您有什么產(chǎn)品需要以及技術(shù)問題解惑都是可以來電給我公司詢問的。旁余之話我們不多說,這里給出了一個(gè)小提醒,在操作時(shí),玻璃涂布棒上的酒精熄滅后稍等片刻,待其冷卻后再涂。實(shí)驗(yàn)過程中也要細(xì)心哦!
    已經(jīng)快要是文章的結(jié)尾了,您還記得我們給出的問題嗎?在問題中已經(jīng)表明實(shí)驗(yàn)?zāi)康臑槿齻(gè)方面,我們*后就來看看究竟是哪三個(gè)方面。
    1、用于分子生物學(xué)其他研究。
    2、將重組DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌受體細(xì)胞進(jìn)行復(fù)制,增殖和表達(dá),以獲得目的基因。
    3、驗(yàn)證大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞效果。

原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司

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