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冰凍切片的實驗技巧—脂肪組織處理

點擊次數(shù)：12994 發(fā)布時間：2016/3/30 9:57:11

脂肪組織無疑是冰凍切片者的絆腳石，道理很簡單脂肪不會結冰，把溫度降低讓脂肪變硬可以切出較薄的片子，但是這個溫度對同一組織中的其他成分來說顯得太低而不合適切片，當脂肪破碎影響切片時這個問題就變得明顯，下面讓我司錢經(jīng)理給大家講解下一些經(jīng)驗。
1.盡可能的削掉不需要的脂肪組織當我準備切淋巴結時，我會先檢查一遍，小心翼翼地除掉表面及髓內的脂肪，結內的脂肪用解剖刀刮擦掉，被膜線附近的脂肪用刀切除，這樣就不需要切開整個淋巴結被膜。有人會說，我把一些組織去掉后，可能導致漏判一些陽性的淋巴結，但我的經(jīng)驗是好的干凈的片子比含有太多脂肪的差片子更容易獲得陽性的結果。當你在休整組織或切片的過程中脂肪組織意外出現(xiàn)時，你也可以使用前面的挖鑿技術。
2.調整組織塊的方向使脂肪*后接觸刀片切片時盡量避免脂肪先接觸刀片，因為脂肪會脫離包埋物，在切片上留下一個洞，如果不能避免，也要在其周圍加上包埋物，讓包埋物先接觸刀片。
3.保證刀片、臺面的干凈及組織塊的冷凍程度切片機的臺面和刀片必須保持干凈，假如你弄碎了一張片子必須即時用一塊干紗布清理干凈，但要防止刀片割手，如果你發(fā)現(xiàn)切出來的片子有條紋或者堆積成束，可能是組織粘著在刀片的下方了，必須除掉刀片上的組織，并將刀片清理干凈。
組織塊越冷就越容易切脂肪，只是其他非脂肪組織就變得堅硬難切，同時水性的組織會裂開，這就有必要在切片溫度的*冷端和*溫端取一個二者兼顧的中間值，以使脂肪和非脂肪組織都能切好。我一般將組織塊凍在-24度，可以獲得滿意的結果，冷凍噴霧劑有用，但要注意先清掉切片機內的污穢。

原創(chuàng)作者：上海恒遠生物科技有限公司